聚乙烯吡咯烷酮（polyvinylpyrrolidone，高效简称为PVP）是液相乙烯一种非离子型高分子化合物，是色谱N-乙烯基酰胺类聚合物中有特色且被研究得最深、最广泛的法测精细化学品品种之一。PVP作为一种合成水溶性高分子化合物，定隐具有水溶性高分子化合物的形眼一般性质，如胶体保护作用、镜护成膜性、理液粘结性、中聚吸湿性、吡咯增溶或凝聚作用。烷酮但PVP最具特色的高效是其优异的溶解性能及生理相容性，也因此倍受人们重视。液相乙烯PVP不参与人体新陈代谢，色谱又具有优良的法测生物相容性，对皮肤、粘膜、眼等不形成任何刺激。PVP用于隐形眼镜，可增加镜片的亲水性和润滑性，这使得PVP在隐形眼镜护理液中得到了广泛应用。
GB19192—2003《角膜接触镜护理液卫生要求》第4条明确提出对角膜接触镜护理液有效成分含量检测的技术要求。聚乙烯吡咯烷酮作为隐形眼镜护理液的有效成分之一，应明确其实际加入的有效量，并建立有效、快捷、准确的分析测定方法。
目前PVP含量的测定方法主要有紫外分光光度法、凝胶色谱检测法，但是这些方法的灵敏度不高，方法条件复杂，操作过程繁琐，且干扰不易消除。角膜接触镜护理液中基体复杂，样品的杂质峰干扰相对严重，难以准确定量，目前此样品尚无有效的检测方法。笔者采用SAX色谱柱对隐形眼镜护理液样品进行分离，在220nm波长处进行PVP的定量分析，经过一系列方法学试验验证，证明该方法准确、简单、高效。
液相色谱仪：U3000型，美国赛默飞世尔科技公司。紫外分光光度计：UV2550型，日本岛津仪器有限公司。超纯水机：MC24T30CN型，出水电阻率为18.2MΩ，默克密理博（中国）有限公司。电子天平：ME104E型，感量为0.1mg，梅特勒–托利多仪器（上海）有限公司。氯化钠：色谱纯，上海阿拉丁生化科技股份有限公司。PVP对照品：纯度（质量分数）不小于99.0%，美国SigmaAldrich公司。角膜接触镜护理液样品：市售。
检测器：二极管阵列检测器；色谱柱：OligoSAX强阴离子交换柱（150mm×4.6mm，5μm，美国赛默飞世尔科技公司）；流动相：20mmol/L氯化钠水溶液；流量：1.0mL/min；柱温：30℃；波长：220nm；进样体积：10μL。
根据角膜接触镜护理液样品中PVP的标示含量，若PVP标示含量在0.01～0.5mg/mL之间，可直接进样；若PVP标示含量大于0.5mg/mL，取适量护理液样品，用超纯水稀释至约0.05mg/mL，作为供试液，待测。
PVP标准溶液：准确称取PVP对照品约0.1g，用超纯水配成1mg/mL的储备液。
PVP系列标准工作溶液：采用逐级稀释法，用超纯水配制PVP质量浓度分别为0.01、0.025、0.050、0.10、0.25、0.50mg/mL的系列标准工作溶液。
常规检测中，一般采用普通的C18反相色谱柱进行物质分离，而大分子量的样品，采用凝胶尺寸排阻色谱进行分离。试验考察了TSK-Gelα3000型亲水性凝胶色谱柱(300mm×7.8mm，7μm，日本TSK公司)和Oligo-SAX强阴离子交换柱的分离效果，结果发现，采用TSK-Gelα3000型凝胶色谱柱进行分离时，峰形拖尾严重且不对称，而在OligoSAX强阴离子交换色谱柱下，PVP能实现完好的分离，且无拖尾现象产生。因此采用Oligo-SAX强阴离子交换柱进行检测分析，可快速有效地分离PVP。
当采用纯水作为流动相时，色谱峰虽能分离，但出现拖尾现象，因此需要配制一定的缓冲溶液对PVP进行洗脱。试验采用氯化钠溶液作为流动相，考察氯化钠的质量浓度分别为0、10、20、50、100mmol/L时对PVP含量测定的影响，结果发现当溶液中氯化钠的质量浓度为20mmol/L时，拖尾现象消失，但随着氯化钠浓度的增大，PVP的分离没有其它变化。为了延长色谱柱的寿命，宜选用较低浓度的流动相，因此，采用20mmol/L氯化钠溶液作为流动相较为适宜。
分别取PVP标准工作溶液与空白基质溶液（按照隐形眼镜护理液的配方，配制不含PVP的隐形护理液作为空白基质溶液），在波长为200～300nm范围内进行扫描，结果显示PVP在波长220nm附近有较大吸收，且空白基质溶液吸收较小，因此选择220nm作为PVP含量的检测波长。
按照1.2仪器工作条件，对0.05mg/mLPVP标准溶液和待测护理液的供试液进行测定，色谱图分别见图2和图3。由图2和图3可知，PVP的保留时间为0.933min。
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相关链接：氯化钠，乙烯吡咯烷酮，N-乙烯基酰胺
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